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PCR儀/基因擴(kuò)增儀技術(shù)資料
發(fā)布時(shí)間: 2017-12-28 點(diǎn)擊次數(shù): 2274次
根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)
,
PCR儀/基因擴(kuò)增儀
將儀器分為普通基因擴(kuò)增儀
,梯度基因擴(kuò)增儀,原位基因擴(kuò)增儀
,實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增儀四類
,下面我們就來(lái)看下他們具體的特色:
1、普通的基因擴(kuò)增儀:把一次
PCR儀/基因擴(kuò)增儀
只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀
,叫傳統(tǒng)的PCR儀
,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行
。主要是做簡(jiǎn)單的
,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究
,教學(xué)
,醫(yī)學(xué)臨床,檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)
。
2
、梯度基因擴(kuò)增儀:把一次性pcr擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度
,這樣的儀器就叫梯度PCR儀
。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其zui適退火溫度不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增
,從而一次性PCR擴(kuò)增
,就可以篩選出表達(dá)量高的zui適退火溫度
,進(jìn)行有效的擴(kuò)增
。
3、原位基因擴(kuò)增儀:用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀
,如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等
。是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中
,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增
,不但可以檢測(cè)到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置
,于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過(guò)程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值
。
4、實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)
,就成了熒光定量PCR儀
。其PCR擴(kuò)增原理和
PCR儀/基因擴(kuò)增儀
擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素
、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記
,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出
。把這PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
。
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